BDNF簡(jiǎn)介：

腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子（BDNF）是神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子家族中的一員，這對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)和外周神經(jīng)系統(tǒng)中某些特定的神經(jīng)組份的分化和存活是必須的。BDNF由分泌的前前體蛋白，經(jīng)裂解成信號(hào)肽和前體蛋白后，前體蛋白裂再裂解成119個(gè)氨基酸的成熟蛋白。BDNF有六個(gè)保守的半胱氨酸殘基，在蛋白內(nèi)部形成三個(gè)二硫鍵。與NGF相似，活性BDNF被預(yù)測(cè)為一個(gè)非共價(jià)結(jié)合的同源二聚體。BDNF 在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中廣泛以自分泌和旁分泌的形式分泌出來(lái)，具有刺激中樞神經(jīng)的營(yíng)養(yǎng)和分化的作用，已證明在記憶形成的過(guò)程中和染色體調(diào)控方面具有重要的作用。此外，在腦垂體、脊髓，心肌和肺及平滑肌中也有低水平的表達(dá)。BDNF可與其高親和力的受體TrkB酪氨酸激酶受體結(jié)合特異性的激活下游信號(hào)通路。

BDNF在血漿中以pg/ml水平存在，但在血清中則以ng/ml水平存，該差異明顯是由于血小板中的BDNF的釋放造成差異。BDNF不同種屬間在結(jié)構(gòu)上的高度的保守性，使得BDNF ELISA可以用于其它種屬的BDNF的檢測(cè)。

檢測(cè)原理:

本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法檢測(cè)樣本中BDNF的濃度。BDNF捕獲抗體已預(yù)包被于酶標(biāo)板上，當(dāng)加入標(biāo)本或參考品時(shí)，其中的BDNF會(huì)與捕獲抗體結(jié)合，其它游離的成分通過(guò)洗滌的過(guò)程被除去。當(dāng)加入生物素化的抗BDNF抗體后，抗BDNF抗體與BDNF接合，形成夾心的免疫復(fù)合物，其它游離的成分通過(guò)洗滌的過(guò)程被除去。隨后加入辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的親合素。生物素與親合素特異性結(jié)合，親合素連接的酶就會(huì)與夾心的免疫復(fù)合物連接起來(lái)；其它游離的成分通過(guò)洗滌的過(guò)程被除去。最后加入顯色劑，若樣本中存在BDNF將會(huì)形成免疫復(fù)合物，辣根過(guò)氧化物酶會(huì)催化無(wú)色的顯色劑氧化成藍(lán)色物質(zhì)，在加入終止液后呈黃色。通過(guò)酶標(biāo)儀檢測(cè)，讀其450nm處的OD值，BDNF濃度與OD₄₅₀值之間呈正比，通過(guò)參考品繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，對(duì)照未知樣本中OD值，即可算出標(biāo)本中BDNF濃度。

BDNF定量分析酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒組成:

標(biāo)本收集:

1.標(biāo)本的收集請(qǐng)按下列流程進(jìn)行操作；

A.細(xì)胞上清標(biāo)本離心去除懸浮物后即可；

B.血清標(biāo)本應(yīng)是自然凝固后，取上清，避免在冰箱中凝固血液；

C.血漿標(biāo)本，推薦用EDTA的方法收集若待測(cè)樣本不能及時(shí)檢測(cè)，

D.標(biāo)本收集后請(qǐng)分裝，凍存于－20℃，避免反復(fù)凍融。

2.血清標(biāo)本不應(yīng)添加任何防腐劑或抗凝劑；

3.標(biāo)本應(yīng)清澈透明，檢測(cè)前樣本中如有懸浮物應(yīng)通過(guò)離心去除。

4.請(qǐng)勿使用溶血，高血脂或污染的標(biāo)本檢測(cè)，否則結(jié)果將不準(zhǔn)確。